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博凌科為的SYBR Green I與dsDNA 結(jié)合熒光信號可增強800～1000倍。在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR Green I熒光染料，它特異性地摻入DNA雙鏈后，熒光信號增強，而不摻入鏈中的SYBR Green I染料分子熒光不變，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。

注意事項：

1．使用濃度對熒光PCR結(jié)果的影響

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SYBR Green I的使用濃度是保證熒光定量PCR實驗成功非常關(guān)鍵的因素。如果SYBR Green I的濃度過低會使熒光信號的變化降低，這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出。而在高濃度時，將會抑制PCR反應(yīng)，降低PCR反應(yīng)效率。所以一般在使用SYBR Green I時應(yīng)根據(jù)實際情況優(yōu)化使用濃度，反應(yīng)的終濃度為0.2×到1×之間。

2．鎂離子濃度的影響

和為工向權(quán)積節(jié)觀劃，存按卻。

提高鎂離子濃度可以降低SYBR Green I對PCR反應(yīng)的抑制作用。我們建議在用SYBR Green I進行熒光PCR反應(yīng)時，鎂離子濃度比無SYBR Green I 的普通 PCR 反應(yīng)高出0.5～3mM。

的地年第角回壓，且千王。

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