蛹蟲草菌種(蛹蟲草液體菌種的制備方法)

蛹蟲草液體菌種的制備方法

一、培養(yǎng)基配方

配方為:玉米粉1%，葡萄糖2%，蛋白胨1%，酵母粉0.5%，磷酸二氫鉀0.1%，水935%，硫酸鎂0.05%，維生素B1 10mg，PH值調(diào)至5左右。

二、生產(chǎn)和栽培方法

制作一級(jí)搖瓶:將這些原料溶于水中，放入500ml三角瓶中，每個(gè)三角瓶200ml，放入3顆左右玻璃珠，塞上棉塞，然后用4層紗布覆蓋棉塞，將瓶口扎緊，放入高壓滅菌器中消毒。當(dāng)壓力表升至0.5kg/cm2時(shí)，清潔空氣，然后關(guān)閉放氣閥，直到溫度計(jì)指針降至0。

接種方法:首先將滅菌后的蛹蟲草液體培養(yǎng)基放在超凈工作臺(tái)上，將蛹蟲草母種和接種掛鉤、酒精燈、酒精棉球等接種物品放在超凈工作臺(tái)上，將工作服掛在接種室進(jìn)行消毒。然后點(diǎn)燃接種室的氣霧劑(最好用臭氧消毒器)，立即關(guān)閉所有門窗進(jìn)行密閉消毒，打開紫外線燈。40分鐘后，煙霧散去，紫外線燈關(guān)閉，接種人員可以接種疫苗。接種方法是穿上工作服，打開潔凈工作臺(tái)風(fēng)扇，打開酒精燈，左手握住母管對(duì)準(zhǔn)火焰口，右手握住鐵鉤，立即放入母管3-5秒，然后將菌種分成5-7段，再用左手迅速打開紗布瓶蓋， 并立即用右手將一段菌鉤入瓶中(每瓶插入5-6片0.5平方厘米的菌種)，并迅速按原樣蓋上瓶蓋。

蛹蟲草菌種接入后，移入22-24℃的恒溫培養(yǎng)室，在搖床上搖床培養(yǎng)菌種。搖床的轉(zhuǎn)速為140轉(zhuǎn)/分鐘。經(jīng)過4-6天的產(chǎn)卵培養(yǎng)，蛹蟲草液體顏色清晰，菌球密集，瓶口有蛹蟲草的氣味，可以判斷該菌株為優(yōu)良菌株。如果發(fā)現(xiàn)瓶?jī)?nèi)細(xì)菌濃度低，氣味難聞，有五顏六色的菌液，則為雜菌污染，一定不能使用。

制作二級(jí)搖瓶:培養(yǎng)基為同一級(jí)別，蛹蟲草液體菌種2000毫升裝于5000毫升三角瓶中，滅菌冷卻后，一級(jí)搖瓶按10%無菌操作放入大搖瓶中，在22-24℃、140轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)72小時(shí)后，菌球大小均勻，密度在80%

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