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想必現(xiàn)在有很多小伙伴對于層析柱純化抗體前一定要硫酸氨沉淀嗎方面的知識都比較想要了解，那么今天小好小編就為大家收集了一些關于層析柱純化抗體前一定要硫酸氨沉淀嗎方面的知識分享給大家，希望大家會喜歡哦。
1、硫酸銨可能會損壞某些蛋白。加入硫酸銨晶體時應小心：局部濃度過高可能會造成不需要的蛋白沉淀。
2、對于常規(guī)可再生的純化過程，可以避免使用硫酸銨沉淀以利于層析。
3、通常沉淀對于濃度低于1mg/ml的蛋白幾乎無效。
4、版共權歸認芝士回設答網(wǎng)站或證原作者所隊有
5、沉淀所需溶液：
6、飽和硫酸銨溶液（在100ml蒸餾水中加入100g硫酸銨，攪拌溶解）。
7、當新氣者果她受步群段且千委選斯。
8、1M Tris-HCl，pH 8.0
9、用于第一步純化的緩沖液。
10、有到也所部制四或問志土般，勞選派包。
11、方法：
12、1，過濾（0.45μm膜）或離心樣品（4°C 10000g）。
13、2，每10倍體積的樣品中加入一倍的1M Tris-HCl，pH 8.0以維持pH值。
14、3，溫和攪拌。逐滴加入硫酸銨溶液，最高至50%飽和度。攪拌1小時。
15、4，10000g離心20min。
16、5，去除上清，用等體積相同濃度的硫酸銨溶液（如不能溶解沉淀也不會造成進一步沉淀的溶液）洗滌重懸沉淀兩次。再次離心。
17、6，使用少量體積后面步驟所需的溶液溶解沉淀。
18、7，硫酸銨在凈化/更換緩沖液步驟中使用脫鹽柱除去。
本文到此結束，希望對大家有所幫助。
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